ROE
ROE
Objetivo:
En esta práctica vamos a realizar la prueba ROE, resistencia osmótica eritrocitaria
Materiales
- Sangre venosa anticoagulada
- Pipetas pasteur
- Tubos de centrífuga
- Gradilla
- Centrífuga
- Cubetas de espectrofotómetro
- Espectrofotómetro
- Papel parafina
- Cloruro Sódico
- Agua destilada
- Pipeta automática de 25 µl
- Puntas de pipeta
- Pipetas graduadas de 5, 10 mL
- Prepipeta
- Balanza
- Espectrofotómetro
- Cubetas para el espectrofotómetro
Preparación de la práctica:
Preparación de la solución madre : 100g de NaCl + 1 L de Agua destilada
Preparar las siguientes soluciones de trabajo a partir de la solución madre :
Procediemiento:
- Se colocan 5mL de cada solución en una bateria de tubos de centrífuga.
- Añadir 50µl de sangre a cada tubo , agitar y dejar a temperatura ambiente durante 45-60 min
- transcurrido el tiempo se centrifugan los tubos a 3000rpm durante 10 y posteriormente separamos el sobrenadante.
- Medir el grado de hemolizado del sobrenadante en el espectrofotómetro a una longitud de onda de 540 nm , considerando el tubo de 1g/L de NaCl como el 100% de hemolisis y el 10g/L como el blanco.
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