Determinación Cuantitativa De Hemoglobina IVD

Determinación Cuantitativa De Hemoglobina IVD


Objetivo:

En esta práctica vamo a realizar la determinación cuantitativa de la hemoglobina. Nos basamos en que la hemoglobina que es oxidada por la acción del ferricianuro a metahemoglobina. La intensidad del color formado, es proporcional a la concentración de hemoglobina presente en la muestra ensayada.


Materiales:


  • Espectrofotómetro
  • Cubetas
  • Equipamiento de laboratorio  
  • Sangre capilar o venosa a modo de muestra


Procedimiento:
  1. Primero debemos encender el espectrofotómetro y ponerlo en las condiciones indicadas y ajustar un blanco
  2. A continuación pipetear las siguientes cantidades:



Blanco
Patrón
Muestra
RT (mL)
2.5
2.5
2.5
Calibrador(μL)
--
10
--
Muestra(μL)
--
--
10

   3. Luego incubamos 3 minutos a temperatura ambiente
   4. Por último leemos la absorvancia de cada cubeta


Resultado:   

 Una vez hecho la lectura de absorbancia, nos da los siguientes resultados:
                (A)Patrón=0,338
                (A)Muestra= 0,510
Ahora realizamos las operaciones necesarias;
    0.510/0.338=1.5X15=22
Vemos que el resultado no está entre los valores estándar, pero se debe a que no respetamos el tiempo de incubación


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