Sideremia. Determinación De Hierro Sérico
Sideremia. Determinación De Hierro Sérico
Objetivo:
En esta práctica vamos a realizar una determinación cuantitativa de hierro IVD. Nos basamos en la capacidad del hierro (Fe) en disociarse del complejo sérico hierro-transferrina en medio ácido débil. El hierro libre se reduce a ión ferroso mediante el ácido ascórbico. Los iones ferrosos en presencia de FerroZine forman un complejo coloreado. Finalmente la intensidad del color formado es proporcional a la concentración de hierro en la muestra que estamos estudiando
Materiales:
- Espectrofotómetro
- Cubetas
- Equipamiento habitual de laboratorio
- Los 3 reactivos que vienen en el kit
- Suero a modo de muestra
Procedimiento:
- Primero debemos encender el espectrofotómetro y ponerlo en las condiciones indicadas y ajustar un blanco
- A continuación pipetear las siguientes cantidades:
Blanco reactivo
|
Patrón
|
Blanco de muestra
|
Muestra
| |
RT(mL)
|
1.0
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1.0
|
1.0
|
1.0
|
R3(gotas)
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1
|
1
|
--
|
1
|
Agua destilada(μL)
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200
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--
|
--
|
--
|
Patrón(μL)
|
--
|
200
|
--
|
--
|
Muestra(μL)
|
--
|
--
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200
|
200
|
3. Luego incubamos 5 minutos a temperatura ambiente
4. Por último leemos la absorbancia de cada cubeta
Resultado:
Tras haber completado toda la práctica hemos hecho la lectura con el espectrofotómetro y no da los siguientes resultados;
(A)Patrón=0,096
(A)Muestra= 0,168
Ahora hacemos los calculos pertinentes:
(0,168/0,096) X 100 = 175µg/dl
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